本產(chǎn)品是用于去除基因組DNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄的試劑盒。該試劑盒在 42℃， 2 分鐘即可除去基因組 DNA。同時(shí)由于反轉(zhuǎn)錄試劑中含有抑制 gDNA Eraser 的組分，經(jīng)過 gDNA Eraser 處理后的樣品可以直接進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)合成 cDNA。本試劑盒配有新型高效反轉(zhuǎn)錄酶 HiFiScript，新穎突變位點(diǎn)大幅提 升酶的轉(zhuǎn)錄活性，cDNA ***鏈合成的效率和產(chǎn)量更高，可利用pg級(jí)的總 RNA 或 mRNA 合成 cDNA ***鏈。如逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 cDNA 用于下游熒光定 量檢測(cè)，可在 42℃，15 分鐘完成逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。本試劑盒適用于***鏈 cDNA 的合成和后續(xù)的 RT-PCR、RT-qPCR、以及全長(zhǎng) cDNA 文庫的構(gòu)建等。

產(chǎn)品特點(diǎn)1．快速去除基因組：含有去除基因組 DNA 的 gDNA Eraser，只需 2 分鐘即可除去基因組 DNA。2．快速逆轉(zhuǎn)錄：15 分鐘即可獲得熒光定量 PCR 模板 cDNA 第一鏈合成。3．靈敏度高：可利用 pg 級(jí)總 RNA 或 mRNA 模板合成 cDNA 第一鏈。4．高效的逆轉(zhuǎn)錄效率：新穎突變位點(diǎn)大幅提升酶活性能，獲得更高產(chǎn)量的cDNA。注意事項(xiàng)1．在操作過程中應(yīng)避免 Rnase 污染，防止 RNA 降解或?qū)嶒?yàn)中的交叉污染，建議操作人員帶口罩和一次性手套并經(jīng)常更換手套，使用專門的儀器和耗材。2．逆轉(zhuǎn)錄體系配制在冰上進(jìn)行操作，防止 RNA 發(fā)生降解。試劑盒的酶使用后盡快置于-20℃保存，并盡量避免反復(fù)凍融。3．反應(yīng)體系可倍比放大，10ul 反應(yīng)體系可最大使用 1ug 總 RNA。4．Primer Mix 由 Oligo(dT)和 Random primer 配制而成，也可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選用 Oligo-dT Primer 或 Gene Specific Primer。5．若起始 RNA 的量小于 50 ng，建議加入 RNA 酶抑制劑。本試劑盒并未提供，如需要可單獨(dú)向本公司訂購(gòu)。6．對(duì)于二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜的 RNA 模板，建議在操作步驟之前，將模板 RNA 在65℃孵育 5 分鐘立刻置于冰上，短暫離心后進(jìn)行下一步操作。使用方法將模板 RNA 在冰上解凍；試劑盒組分在室溫解凍后立刻置于冰上。使用前將每種溶液渦旋振蕩混勻，并經(jīng)短暫離心后使用。

去除基因組 DNA 反應(yīng)1）根據(jù)以下表格在冰上配制反應(yīng)體系，總體積為 10ul。為了保證反應(yīng)液配制的準(zhǔn)確性，先按反應(yīng)數(shù)+2 的量配制預(yù)混體系，然后再分裝到每個(gè)反應(yīng)管中，最后加入 RNA 樣品。