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細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)如何選擇赤蘚紅素 B 和比臺(tái)盼藍(lán)?

更新時(shí)間:2025-05-30      點(diǎn)擊次數(shù):652

細(xì)胞計(jì)數(shù)對(duì)于細(xì)胞濃度和活力的可重現(xiàn)和準(zhǔn)確記錄非常重要,可用于一系列研究、醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)應(yīng)用。盡管臺(tái)盼藍(lán)存在許多記錄在案的問(wèn)題和局限性,但它仍然被廣泛用于許多研究實(shí)驗(yàn)室。本文旨在重點(diǎn)介紹赤蘚紅素 B,這是一種毒性較小且無(wú)憂的臺(tái)盼藍(lán)細(xì)胞活力染料替代品。

了解臺(tái)盼藍(lán)

但首先,讓我們了解臺(tái)盼藍(lán)的局限性。該列表的最頂部是臺(tái)盼藍(lán)對(duì)人和細(xì)胞的毒性。臺(tái)盼藍(lán)會(huì)因染料吸收而隨著時(shí)間的推移降低細(xì)胞活力。建議在混合樣品后盡快計(jì)數(shù)細(xì)胞。大量研究還表明,臺(tái)盼藍(lán)具有潛在致癌性,可導(dǎo)致細(xì)胞周期和細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)發(fā)生變化 (1-6)。因此,它被貼上了對(duì)動(dòng)物和環(huán)境有害的標(biāo)簽。

臺(tái)盼藍(lán)在儲(chǔ)存過(guò)程中容易沉淀,在血球計(jì)數(shù)器和/或自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀上計(jì)數(shù)時(shí)可能表現(xiàn)為碎片。保持臺(tái)盼藍(lán)的清潔需要加熱、過(guò)濾或離心以去除晶體,以避免干擾細(xì)胞計(jì)數(shù)或錯(cuò)誤表征細(xì)胞。此外,細(xì)胞樣品中存在碎片使得區(qū)分無(wú)核細(xì)胞與真碎片、死細(xì)胞或晶體極為困難。由于這些限制,它可能導(dǎo)致個(gè)體高度主觀計(jì)數(shù)和自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)不準(zhǔn)確。對(duì)于活力低于 80% 的樣品尤其如此。此外,臺(tái)盼藍(lán)還可以與培養(yǎng)基或血清中的蛋白質(zhì)結(jié)合,這會(huì)干擾其與死細(xì)胞的適當(dāng)結(jié)合親和力。

以上所有情況都可能導(dǎo)致在研究的許多關(guān)鍵點(diǎn)為優(yōu)化或標(biāo)準(zhǔn)化用于藥物開(kāi)發(fā)、細(xì)胞治療或數(shù)據(jù)生成的方案收集的數(shù)據(jù)不一致。

介紹赤蘚紅 B,臺(tái)盼藍(lán)的替代品

介紹赤蘚紅素 B,一個(gè)更好、更明亮的選擇! 赤蘚紅素 B 在國(guó)際上用作低劑量的食品添加劑,被歸類為無(wú)毒。它是一種生物安全染料,用于染料排斥測(cè)試以測(cè)量細(xì)胞活力。與臺(tái)盼藍(lán)類似,該測(cè)定基于以下原理:具有完整細(xì)胞膜的活細(xì)胞會(huì)排除染料的極性分子并保持未染色,而膜受損的死細(xì)胞則不會(huì),因此看起來(lái)更暗。

赤蘚紅 B 細(xì)胞活力檢測(cè)依賴于與臺(tái)盼藍(lán)檢測(cè)相同的原理,其中活細(xì)胞排除染料,而受損細(xì)胞被染色。然而,與臺(tái)盼藍(lán)相比,赤蘚紅素 B 的一些優(yōu)勢(shì)包括與細(xì)胞混合時(shí)毒性較低、在不同溫度和儲(chǔ)存條件下的穩(wěn)定性以及減少血清蛋白的結(jié)合。赤蘚紅素 B 相對(duì)于臺(tái)盼藍(lán)的這些優(yōu)勢(shì)顯著減少了在細(xì)胞活力和群體密度測(cè)定過(guò)程中導(dǎo)致細(xì)胞錯(cuò)誤表征的變量。這會(huì)產(chǎn)生更準(zhǔn)確和可靠的計(jì)數(shù)。

可以理解的是,一些研究人員仍然對(duì)從臺(tái)盼藍(lán)染色轉(zhuǎn)向赤蘚紅 B 染色心存疑慮,因?yàn)榕_(tái)盼藍(lán)歷來(lái)是細(xì)胞計(jì)數(shù)的黃金標(biāo)準(zhǔn)方法。這通常是由于他們不愿意更改當(dāng)前的協(xié)議。然而,赤蘚紅 B 可以使用相同的檢測(cè)方案、硬件和類似的儀器設(shè)置來(lái)替代臺(tái)盼藍(lán)。臺(tái)盼藍(lán)和赤蘚紅素 B 之間也沒(méi)有顯著的價(jià)格差異。

結(jié)論

赤蘚紅素 B 是臺(tái)盼藍(lán)的毒性較小的替代品,具有多種優(yōu)勢(shì),可實(shí)現(xiàn)更可靠的細(xì)胞計(jì)數(shù)。雖然臺(tái)盼藍(lán)是細(xì)胞計(jì)數(shù)的傳統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)品,但研究表明,赤蘚紅 B 是一種易于使用、成本效益高且毒性較小的替代品。




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